تعداد نشریات | 31 |
تعداد شمارهها | 766 |
تعداد مقالات | 7,260 |
تعداد مشاهده مقاله | 10,623,587 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 7,093,725 |
ترانسفورماسیون برنج (Oryza sativa L.) با ژنهای گزینشگر هایگرومایسین (hpt) و گزارشگر بتاگلوکورونیداز (gus) به روش In planta | ||
تحقیقات غلات | ||
مقاله 4، دوره 2، شماره 1، خرداد 1391، صفحه 45-55 اصل مقاله (169.29 K) | ||
نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
نویسندگان | ||
طیبه سلامت1؛ سمیه اللهی1؛ محمد مهدی سوهانی* 2؛ علی اعلمی2 | ||
1دانشجوی سابق کارشناسی ارشد گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده علوم کشاورزی دانشگاه گیلان | ||
2استادیار گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده علوم کشاورزی دانشگاه گیلان | ||
چکیده | ||
گیـاهان تراریختـه اغلب به وسیله روشهایی بر پایه کشت بافت تولید میشوند که روشهای پیچیـدهای بوده و نیاز به آماده سـازی و انتخـاب دقیق ریزنمونه، انتخاب بافتهای تراریخت شده و باززایی گیاهان تراریخته در شرایط in vitro را دارند. در این آزمایش، گیاهان تراریخته در شرایط غیر استریل تولید شدند. بدین منظور بذور دو رقم برنج بومی تیپ ایندیکا خیسانده شدند تا جنین فعال و شروع به رشد کند. سپس منطقه جنینی با حداقل آسیب به جنین زخمزنی و با دو سویه اگروباکتریوم تومه فاشیینس (Agrobacterium tumefaciens) حامل ناقل pCAMBIA1105. 1R تلقیح شدند. القاء ژنهای vir در محیط کشت خاصی که بدین منظور طراحی شده است انجام شد. بذور بعداً جوانهزده و در تحت شرایط غیر استریل رشد کردند. تأیید الحاق ژن انتقالی به درون ژنوم گیاهان تراریخته نسل T0 و T1 با استفاده از روش PCR شامل دو ژن در داخل منطقه T-DNA، مقاومت بافت برگی به آنتیبیوتیک هایگرومایسین و آزمون بافت شیمیایی GUS انجام شد. بیشترین کارایی ترانسفورماسیون در نسل T0مربوط به تیمار زخمزنی به وسیله خراش با اسکالپل آغشته به اگروباکتریوم به میزان 72/11 درصد در رقم هاشمی 75/9 درصد بوده است. کارایی ترانسفورماسیون در رقم هاشمی در شرایط سوزنزنی همراه با خلاء نیز به طور معنیداری از تلقیح تحت شرایط غیرخلاء بیشتر بوده است. به منظور بررسی پایداری ژن تراریخته گیاهان نسل T1به طریق مشابهنسل T0 آنالیز مولکولی شده و نتایج نشان داد که همچنان 19 درصد گیاهان نسل T1تراریخت بودهاند. | ||
کلیدواژهها | ||
استوسیرینگون؛ القاء ژنهای vir؛ برنج؛ ژنهای گزینشگر و گزارشگر؛ Agrobacterium tumefaciens | ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 1,601 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 852 |