تعداد نشریات | 31 |
تعداد شمارهها | 744 |
تعداد مقالات | 7,082 |
تعداد مشاهده مقاله | 10,200,461 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 6,876,096 |
بررسی بیوشیمیایی انواع پروتئازهای گوارشی اختصاصی در کفشدوزک Cryptolaemus montrouzieri Mulsant (Col.: Coccinellidae) و تاثیر طعمه-های مختلف بر فعالیت آنها | ||
تحقیقات آفات گیاهی | ||
مقاله 7، دوره 10، شماره 2، شهریور 1399، صفحه 75-91 اصل مقاله (934.71 K) | ||
نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
شناسه دیجیتال (DOI): 10.22124/iprj.2020.4293 | ||
نویسنده | ||
آرش زیبایی* | ||
گروه گیاهپزشکی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان | ||
چکیده | ||
انواع و ویژگیهای بیوشیمیایی پروتئازهای گوارشی در لاروها و افراد بالغ کفشدوزک شکارگر Cryptolaemus montrouzieri Mulsantبا استفاده از سوبستراها و بازدارندههای اختصاصی تعیین و تغییر فعالیت آنها پس از تغذیه روی طعمههای مختلف ارزیابی شد. کفشدوزکها در شرایط آزمایشگاه پرورش یافته و با شپشک آرد آلود تغذیه شدند. تشریح بدن در محیط کلرید سدیم انجام شد و لوله گوارش نمونهها همگن و سانتریفیوژ شد. سپس فعالیت انواع پروتئازهای گوارشی تحت تاثیر سوبستراها و بازدارندههای اختصاصی و با تغذیه از سه میزبان تعیین شد. نتایج نشان داد که فقط سیستئین پروتئازها و اگزوپپتیدازها در معده افراد بالغ فعال بودند، اما در لاروها، سرین و سیستئین پروتئازها نیز در هضم نقش داشتند. بیشترین فعالیت سرین پروتئازهای تریپسین، کیموتریپسین و الاستاز لاروها به ترتیب در اسیدیتههای 8، 8-9 و 9 به دست آمد. اسیدیته بهینه فعالیت کاتپسینهای B و L به ترتیب در مقادیر 6 و 5 در لاروها و افراد بالغ کفشدوزک C. montrouzieriتعیین شد. بیشترین فعالیت آمینو- و کربوکسی پپتیداز گوارشی لاروها در اسیدیته 7 اندازهگیری شد، اما این دو آنزیم در افراد بالغ به ترتیب در اسیدیتههای 7 و 6 بیشترین فعالیت را نشان دادند. بازدارندههای اختصاصی سیستاتین، E-64، TLCK، SBTI، TPCK و AEBSF.HCL سبب کاهش معنیدار فعالیت پروتئازهای اختصاصی لاروها و افراد بالغ C. montrouzieriشدند. تفاوت معنیداری در فعالیت سرین پروتئازها، اگزوپپتیدازها و کاتپسین L لاروهای تغذیه شده از شپشک آردآلود مرکبات Planococcus citri، شپشک آردآلود چای Pseudococcus viburniو شته چای Toxoptera aurantiiمشاهده نشد، اما سیستئین پروتئازها و آمینوپپتیداز افراد بالغ تغذیه شده از شته چای کمترین فعالیت را از خود نشان دادند. تفاوت پروفایل پروتئازی در لاروها و افراد بالغ این کفشدوزک موید تفاوت فیزیولوژیک این دو مرحله زیستی و اهمیت سرین پروتئازها در فرآیندهای حفظ و نگهداری شرایط رشدی دستگاه گوارش است. علاوه براین، فعالیت بیشتر سیستئین پروتئازها در افراد بالغ به ماهیت طعمه مصرف شده و وجود ترکیبات مختلف پروتئینی و حتی گلیکوپروتئینی در طعمهها باز میگردد. | ||
کلیدواژهها | ||
پروتئاز؛ Cryptolaemus montrouzieri؛ فعالیت آنزیمی | ||
مراجع | ||
Fabrick, J., Behnke, C., Czapla, T., Bala, K., Rao, A.G., Kramer, K.J. and Reeck, G.R. 2002. Effects of a potato cysteine proteinase inhibitor on midgut proteolytic enzyme activity and growth of the southern cornrootworm, Diabrotica undecimpunctata howardi (Coleoptera: Chrysomelidae). Insect Biochemistry and Molecular Biology32: 405-415.
Ferreira, C. and Terra, W.R. 1983. Physical and kinetic properties of a plasma-membranebound P-D-glucosidase (cellobiase) from midgut cells of an insect (Rhynchosciara americana larva). Biochemistry Journal 213: 43–51.
Gholamzadeh-Chitgar, M., Ghadamyari, M. and Ghanbarinejad, R. 2017. Biochemical properties of digestive proteases of melon ladybird, Epilachna chrysomelina (Fabricius) (Col.: Coccinellidae). Journal of Entomological Society of Iran 37: 293-304 [In Persian].
Kanost, M.R. and Clem, R.J. 2011. Insect proteases. In: Gilbert, L.I. (Ed.), Insect Molecular Biology and Biochemistry. Elsevier, Amsterdam, pp. 346–364.
Koo, M. S. and Park, Y. C. 2002. Gut luminal digestive proteinases of adult Lady Beetle, Harmonia axyridis (Coccinellidae: Coleoptera), fed an artificial diet. Journal of Asia-Pacific Entomology 5: 167-173.
Lemos, F. J. A., Campos, F. A. P., Silva, C. P. and Xavier-Filho, J. 1990. Proteinases and amylases of larval midgut of Zabrotes subfasciatus reared on cowpea (Vigna unguiculata) seeds. Entomologia Experimentalis et Applicata56: 219-227.
Lowry, O.H., Rosebrough, N.J., Farr, A.L. and Randall, R.J. 1951. Protein measurement with the Folin phenol reagent. Journal of Biological Chemistry 193: 265–275.
Mehrabadi, M. and Bandani, A. R. 2011. Secretion and formation of perimicrovillar membrane in the digestive system of the Sunn pest, Eurygaster integriceps (Hemiptera: Scutelleridae) in the response of feeding. Archives of Insect Biochemistry and Physiology 78: 190-200.
Nation, J.L. 2008. Insect Physiology and Biochemistry, 2nd edition. CRC Press, London.
Norén, O., Sjostrom, H., Danielsen, E. M., Cowell, G. M. and Skovbjerg, H. 1986. The enzymes of the enterocyte plasma membrane. In P. Desnuelle, H. Sjostrom, and O. Norén (Eds.), Molecular and Cellular Basis of Digestion (pp. 355–365). Amsterdam: Elsevier.
Oppert, B., Morgan, T. D., Hartzer, K., Lenarcic, B., Galesa, K., Brzin, J., Turk, V., Yoza, K., Ohtsubo, K. and Kramer, K. J. 2003. Effects of proteinase inhibitors on digestive proteinases and growth of the red flour beetle, Tribolium castaneum (Herbst) (Coleoptera: Tenebrionidae). Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology and Pharmacology134: 481-490.
Pascual-Ruiz, S., Carrilo, L., Alvarez-Alfageme, F., Ruiz, M., Castanera, P. and Ortego, F. 2009. The effects of different prey regimes on the proteolytic digestion of nymphs of the spined soldier bug, Podisus maculiventris (Hemiptera: Pentatomidae). Bulletin of Entomological Research 99: 487-491.
Rawlings, N. D., Barrett, A. J. and Bateman, A. 2010. MEROPS: the peptidase database. Nucleic Acids Research 38: D227–D233.
Sakurai, H. 1968. Physiological studies on the digestion of coccinellid beetle (Coleoptera: Coccinellidae), with special reference to their food habits. Applied Entomology and Zoology 3: 130-138.
Sorkhabi-Abdolmaleki, S., Zibaee, A., Hosseini, R. and Hoda, H. 2013. Effects of different prey regimes on activities of digestive enzymes in Andrallus spinidens (Hem.: Pentatomidae). Journal of Entomological Society of Iran 33: 57-68 [In Persian].
Tatli, A., Bandani, A. and Naghdi, M. 2010. Study of the digestive protease in the elm leaf beetle Xanthogaleruca luteola (Col., Chrysomylidae). Proceedings of the 19th Iranian Plant Protection Congress, 9-12 Aug., Tehran, Iran, p. 300 [In Persian].
Terra, W.R. and Ferriera, C. 2012. Biochemistry of digestion. In: Gilbert, L.I. (Ed.), Insect Molecular Biology and Biochemistry. Elsevier, pp. 365–418.
Walker, A. J., Ford, L., Majerus, M. E. N., Geoghegan, I. E., Birch, N., Gatehouse, J. A. and Gatehouse, A. M. R. 1998. Characterisation of the mid-gut digestive proteinase activity of the two-spot ladybird (Adalia bipunctata L.) and its sensitivity to proteinase inhibitors. Insect Biochemistry and Molecular Biology 28: 173–180.
Zibaee, A. 2011. Digestive enzymes of large cabbage white butterfly, Pieris brassicae L. (Lepidoptera: Pieridae) from developmental and site of activity perspectives. Italian Journal of Zoology 79: 13-26.
| ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 626 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 636 |